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使用凱氏定氮儀時(shí)應注意事項有哪些? 德瑞克股份小編給大家匯總了下:
(1) 樣品應是均勻的。固體樣品應預先研細混勻,液體樣品應振搖或攪拌均勻。
(2) 樣品放入定氮瓶?jì)葧r(shí),不要沾附頸上。萬(wàn)一沾附可用少量水沖下,以免被檢樣消化不完全,結果偏低。
(3) 消化時(shí)如不容易呈透明溶液,可將定氮瓶放冷后,慢慢加入30%過(guò)氧化氫,促使氧化。
(4) 在整個(gè)消化過(guò)程中,不要用強火。保持和緩的沸騰,使火力集中在凱氏瓶底部,以免附在壁上的蛋白質(zhì)在無(wú)硫酸存在的情況下,使氮有損失。
(5) 如硫酸缺少,過(guò)多的硫酸鉀會(huì )引起氨的損失,這樣會(huì )形成硫酸氫鉀,而不與氨作用。因此,當硫酸過(guò)多的被消耗或樣品中脂肪含量過(guò)高時(shí),要增加硫酸的量。
(6) 加入硫酸鉀的作用為增加溶液的沸點(diǎn),硫酸銅為催化劑,硫酸銅在蒸餾時(shí)作堿性反應的指示劑。
(7) 混合指示劑在堿性溶液中呈綠色,在中性溶液中呈灰色,在酸性溶液中呈紅色。
(8) 氨是否完全蒸餾出來(lái),可用pH試紙試餾出液是否為堿性。
(9) 以硼酸為氨的吸收液,可省去標定堿液的操作,且硼酸的體積要求并不嚴格,亦可免去用移液管,操作比較簡(jiǎn)便。
(10) 向蒸餾瓶中加入濃堿時(shí),往往出現褐色沉淀物,這是由于分解促進(jìn)堿與加入的硫酸銅反應,生成氫氧化銅,經(jīng)加熱后又分解生成氧化銅的沉淀。有時(shí)銅離子與氨作用,生成深藍色的結合物[Cu(NH3)4]2+
(11) 這種測算方法本質(zhì)是測出氮的含量,再作蛋白質(zhì)含量的估算。只有在被測物的組成是蛋白質(zhì)時(shí)才能用此方法來(lái)估算蛋白質(zhì)含量。
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